“邊緣效應”是指在利用96孔板進行細胞培養時,細胞在孔板中的位置會影響細胞的生長狀態,尤其是處在周邊及四個角的孔中細胞通常會表現出分布不均的現象。
出現“邊緣效應”的原因主要有兩方面:
1. 溫度效應:經研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因。孔板的聚苯乙烯本身為不良熱導體,在實驗室的常規ELISA測定中,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,板也升溫時,在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度。
2. 蒸發效應:雖然通常細胞培養箱中都會放置一盤雙蒸水以維持培養箱中的濕度,但仍難達到多孔板中的濕度,特別是在培養箱經常開關的情況更是如此。由于位置效應,邊緣孔的濕度較中間孔更低,水分揮發的現象就更為嚴重。這樣就容易造成四周培養基的體積會明顯少于中間孔,而四個角落的孔尤為嚴重。
所以我們在鋪96孔板的時候,一般外圍這一圈是加PBS,中間的60個孔才加細胞。
細節決定成敗,細胞鋪板看似簡單,實則需要耐心、細致的操作。當然,熟能生巧,相信你多鋪幾塊板,自己也能總結出自己的經驗。
*以上均來源于網絡